X
XLinkedinWhatsAppTelegramTelegram
0
Czytaj ten artykuł w:

Diagnostyka laboratoryjna: epidemiczna biegunka świń (PED)

Jakich laboratoryjnych metod diagnostycznych mogę użyć do zdiagnozowania PED? Którą z nich wybrać w zależności od sytuacji? Jak interpretować wyniki?

Dostępne testy

Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR)

  • Wykrywa obecność określonej sekwencji wirusowego kwasu nukleinowego (RNA)
  • Rodzaje próbek: tkanki jelitowe, kał, wymazy z odbytu, płyny ustne itp.
  • Zalety:
    • Bardzo wysoka czułość (możliwość wykrycia niewielkich ilości wirusa)
    • Wczesne wykrywanie - ostre przypadki powinny być dodatnie
    • Można stosować wiele różnych rodzajów próbek (tkanka jelitowa, kał, wymazy z odbytu, płyny ustne itp.)
    • Umiarkowany koszt
      • Często można połączyć 10 próbek kału/wymazów lub próbek tkanki jelitowej, aby obniżyć koszty, jednocześnie minimalizując utratę czułości.
      • Często nie łączy się płynów ustnych ze względu na oczekiwane wyższe wartości Ct (niższe stężenia wirusa), co może skutkować znaczną utratą czułości.
  • Wady:
    • Sekwencjonowanie potrzebne do odróżnienia wirusa szczepionkowego od wirusa typu dzikiego
    • Zanieczyszczenie środowiska może generować wiele dodatkowych wyników - duże ilości wirusa są wydalane przez zakażone świnie

Test immunoenzymatyczny (ELISA)

  • Wykrywa obecność przeciwciał
    Rodzaje próbek: surowica, płyny ustne
  • Zalety:
    • Zwierzęta pozostają dodatnie przez kilka tygodni, zwłaszcza IgA w płynach ustnych
    • Może być stosowany w przypadkach chronicznych
  • Wady:
    • Mogą występować różnice w wykrywaniu między różnymi testami
    • Zwierzęta stają się dodatnie serologicznie w ciągu 7-14 dni.
    • Nie można odróżnić przeciwciał matczynych od poinfekcyjnych
    • Nie można odróżnić zakażenia szczepionką od zakażenia wirusem typu dzikiego
    • Najlepiej mieć test ELISA, który wykrywa poziomy IgA, szczególnie w przypadku płynów ustnych.

Immunohistochemia (IHC)

  • Wykrywa obecność antygenu wirusowego
  • Rodzaje próbek: tkanki jelitowe
  • Zalety:
    • Wykrywa wirusa w miejscu uszkodzenia (dobry dowód związku przyczynowego)
    • Potrafi zidentyfikować niskie vs umiarkowane vs wysokie ilości obecnego wirusa
Zdjęcie 1.Barwienie  IHC  jelita cienkiego zainfekowanego PEDV Źródło: Iowa State University VDL.
Zdjęcie 1.Barwienie  IHC  jelita cienkiego zainfekowanego PEDV Źródło: Iowa State University VDL.
  • Wady:
    • Należy dostarczyć prawidłową próbkę tkanki
    • Wymaga obecności znacznie większej ilości wirusa niż PCR
    • Ocena tylko małej próbki tkanki
    • U prosiąt kosmki jelitowe są szybko niszczone, co powoduje dramatyczne zmiany w ilości obecnego wirusa (barwienie) w ciągu zaledwie 2 dni.

Immunofluoerscencja (IFA)

  • Wykrywa obecność przeciwciał
  • Rodzaje próbek: surowica
  • Zalety:
    • Wysoka czułość wykrywania
  • Wady:
    • Niewykonalne dla dużej liczby próbek
    • Na wyniki ma wpływ izolat wirusa użyty do testu
    • Rzetelność wyniku w dużym stopniu zależy od umiejętności technika i różni się znacznie między laboratoriami

Interpretacja wyniku

PCR

  • Dodatni - wirus jest obecny. Niedawne szczepienie zmodyfikowanym żywym wirusem może skutkować dodatnimi wynikami PCR. Po zakażeniu wydalane są bardzo duże ilości wirusa (bardzo niskie wartości Ct; jednocyfrowe), zwłaszcza u młodych świń. Wydalanie i skażenie środowiska może występować przez długi czas.

Tabela 1. Duże ilości cząstek wirusa są wydalane z kałem zakażonych prosiąt (jednocyfrowe wartości Ct w PCR), co powoduje duże zanieczyszczenie środowiska.

PED PCR Ct a liczba kopii genomowych
42 1
39 10
36 100
32 1,000
29 10,000
26 100,000
22 1,000,000
19 10,000,000
16 100,000,000
12 1,000,000,000
9 10,000,000,000
6 100,000,000,000
  • Ujemny - Ujemny lub wirus mógł zostać przeoczony, jeśli test został przeprowadzony późno po zakażeniu.

ELISA

  • Dodatni - przeciwciała matczyne lub wcześniejsza ekspozycja (zwykle > 7-14 dni po ekspozycji) na szczepionkę lub wirusa typu dzikiego.
  • Ujemny - Ujemny, zakażenie zbyt wcześnie, aby je wykryć (zwykle musi nastąpić co najmniej 7-14 dni po ekspozycji) lub zbyt długo po zakażeniu (szczególnie w przypadku pomiaru IgG w surowicy).

IHC

  • Dodatni - wirus jest obecny w miejscu uszkodzenia.
  • Ujemny - Ujemny lub infekcja nastąpiła zbyt późno, aby wykryć wirusa

IFA

  • Dodatni - przeciwciała matczyne lub wcześniejsza ekspozycja (> 7-14 dni po ekspozycji) na szczepionkę lub wirus typu dzikiego.
  • Ujemny - brak odpowiedzi na szczepionkę lub wirusa typu dzikiego lub infekcja zbyt wczesna do wykrycia (musi nastąpić co najmniej 7-10 dni po ekspozycji)

Możliwe scenariusze

Biegunka prosiąt z bardzo wysoką śmiertelnością w porodówce

  • Jelita od 2-5 prosiąt do badań histologicznych i IHC
  • Jelita lub zawartość kału / wymazy od 5 prosiąt i badanie jako 1 próbka zbiorcza za pomocą PCR

Loszki z biegunką +/- wymioty

  • Pobrać płyny ustne z 2 do 4 różnych kojców i przetestować indywidualnie za pomocą PCR. Nie należy łączyć próbek do badań.
  • Pobrać od 10 do 15 wymazów z odbytu od świń z objawami klinicznymi lub losowo i przetestować metodą PCR. Można łączyć w grupy po 5 do testów PCR.

Badanie loszek w izolacji po ekspozycji na żywego wirusa PED z gospodarstwa przed wprowadzeniem do stada

  • Nie zaleca się przeprowadzania testów, ponieważ skażenie środowiska będzie wysokie, a loszki będą wykazywały dodatni wynik w badaniu kału lub płynów ustnych przez kilka tygodni, nawet po tym, jak przestaną rozsiewać wirusa i będzie można je bezpiecznie wprowadzić do stada hodowlanego.

Warchlak z ostrą biegunką po odsadzeniu

  • Pobrać płyny ustne z 2 do 4 różnych kojców i przetestować indywidualnie za pomocą PCR. Nie należy łączyć próbek do badań.
  • Pobrać od 10 do 15 wymazów z odbytu od świń z objawami klinicznymi lub losowo i przetestować metodą PCR. Można łączyć w grupy po 5 do testów PCR.

Więcej informacji w "Podręczniku chorób"

Epidemiczna biegunka świńEpidemiczna biegunka świń wywoływana jest przez koronawirus, który prowadzi do wymiotów i biegunki, ze śmiertelnością sięgającą 100% wśród wrażliwych prosiąt w wieku poniżej 2 tygodnia życia.

Komentarze do artykułu

To miejsce jest przeznaczone do dyskusji między użytkownikami pig333.com a nie do zadawania pytań autorom artykułów
Skomentuj

Dostęp tylko dla użytkowników portalu 3trzy3. Zaloguj się aby dodać komentarz.

Nie jesteś subskrybentem tej zawartości 3trzy3 w 3 minuty

Cotygodniowy newsletter podsumowujący najnowsze informacje z 3trzy3.pl

Zaloguj się i zapisz do subskrypcji

Powiązane artykuły

Powiązane produkty w sklepie

Sklep specjalizujący się w branży świń
Doradztwo i serwis techniczny
Ponad 120 marek i producentów
Nie jesteś subskrybentem tej zawartości 3trzy3 w 3 minuty

Cotygodniowy newsletter podsumowujący najnowsze informacje z 3trzy3.pl

Zaloguj się i zapisz do subskrypcji