Dostępne testy
Zmiany makroskopowe
- Ocenia obecność zmian w tkankach, które mogą być niemal diagnostyczne dla choroby.
- Lokalizacja zmian: płuca
- Martwiczo-krwotoczne obszary konsolidacji w płucach, którym towarzyszy włóknikowe zapalenie opłucnej (patrz ryc. 1).
![Ryc. 1: Typowe martwiczo-krwotoczne zmiany w płucach związane z infekcją APP. Źródło: ISU-VDPAM.](https://www.3trzy3.pl/3tres3_common/art/pl/6174/typowe-martwiczo-krwotoczne-zmiany-w-płucach-związane-z-infekcją-app_288991.jpg?w=820&q=1&ts=1723017883)
![](https://www.3trzy3.pl/3tres3_common/dist_nou/css/images/imb5.png)
- Zalety:
- Po dokładnym zbadaniu płuc można postawić wstępną diagnozę.
- Wady:
- Actinobacillus suis może powodować podobne zmiany, choć mniej nasilone.
- Nie można określić serotypu.
Hodowla bakteryjna
- Wyizolowanie żywego patogenu
- Rodzaj próbki: płuca
- Zalety:
- Możliwość pracy w dowolnym laboratorium (w tym we własnym)
- Biotyp I wymaga NAD (zwykle dostarczane z koloniami Staphylococcus aureus)
- Biotyp II nie wymaga NAD
- Stosunkowo niski koszt
- Wady:
- Nie zawsze łatwe w hodowli
- Nie ma możliwości serotypizowania
- Z materiału pochodzącego od świń, które otrzymywały antybiotyki można otrzymać wyniki fałszywie ujemne
Podatność na środki przeciwdrobnoustrojowe
- Testy in vitro: zdolność żywego organizmu do wzrostu pod wpływem określonych stężeń różnych środków przeciwdrobnoustrojowych.
- Rodzaj próbki: płuco
- Zalety:
- Identyfikacja wrażliwości lub oporności konkretnego izolatu na powszechnie stosowane środki przeciwdrobnoustrojowe
- Identyfikacja trendów oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe
- Wady:
- Wymaga izolatu bakterii
- Wyniki testów in vitro mogą nieznacznie różnić się od wyników in vivo.
- Niektórych konkretnych środków przeciwdrobnoustrojowych nie można przetestować lub wymagają one oddzielnych, specjalnych testów.
- Umiarkowany koszt
Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) ogólna lub z serotypowaniem
- Wykrywa obecność określonej sekwencji bakteryjnego kwasu nukleinowego (DNA)
- Rodzaje próbek: płuca i migdałki
- Zalety:
- Wysoka czułość
- Ogólna
- Wykrywa materiał genetyczny genów toksyny ApxIV
- Obecna we wszystkich serotypach APP
- Serotypizująca
- Wykrywa materiał genetyczny różnych fragmentów genów toksyn ApxI, ApxII i ApxIII
- W Tabeli 1 wyszczególnione są poszczególne toksyny i serotypy
- Umiarkowany koszt
- Często można łączyć próbki kału lub tkanek, aby obniżyć koszty, jednocześnie minimalizując utratę czułości
- Wady:
- Wymaga wielu różnych starterów PCR do określenia poszczególnych serotypów
- Nie wszystkie izolaty można serotypizować
- Obecnie możliwe jest zidentyfikowanie i namnożenie 19 serotypów
- Nie wszystkie testy są zwalidowane do badań tkanki migdałków
Tabela 1: Wytwarzanie toksyn dla każdego serotypu.
Produkowana toksyna | ||||
---|---|---|---|---|
Serotyp | ApxI | ApxII | ApxIII | ApxIV |
1 | X | X | X | |
2 | X | X | X | |
3 | X | X | X | |
4 | X | X | X | |
5 | X | X | X | |
6 | X | X | X | |
7 | X | X | ||
8 | X | X | X | |
9 | X | X | X | |
10 | X | X | ||
11 | X | X | X | |
12 | X | X | ||
13 | X | X | ||
14 | X | X | ||
15 | X | X | X | |
16 | X | X | X | |
17 | X | X | ||
18 | X | X | ||
19 | X | X |
Enzymatyczny test immunosorbcyjny (ELISA) Antygen LPS-O
- Wykrywa obecność przeciwciał
- Rodzaje próbek: surowica
- Oparta o: antygen LPS-O
- Zalety:
- Może być przydatna w serotypowaniu
- Wysoka czułość
- Wady:
- Duża reaktywność krzyżowa między serotypami ze względu na wspólne epitopy antygenu otoczkowego i LPS-O.
- Następujące serotypy reagują krzyżowo ze względu na wspólne antygeny LPS-O:
- Reakcja krzyżowa między serotypami 1, i 11
- Reakcja krzyżowa między serotypami 3, 6, 8, 15, 17 i 19
- Reakcja krzyżowa między serotypami 4, 7 i 18
- Następujące serotypy reagują krzyżowo ze względu na wspólne antygeny LPS-O:
- Nie można określić konkretnego serotypu za pomocą tylko jednego testu
- Testy na obecność wszystkich serotypów są bardzo kosztowne i niepraktyczne.
- Duża reaktywność krzyżowa między serotypami ze względu na wspólne epitopy antygenu otoczkowego i LPS-O.
Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) antygen ApxIV
- Wykrywa obecność przeciwciał
- Rodzaje próbek: surowica
- Oparta o:antygen ApxIV
- Zalety:
- Wysoka czułość
- Wykrywa wszystkie serotypy APP
- Wady:
- Nie można określić konkretnego serotypu
- Nie można określić zjadliwości izolatu
Interpretacja wyników
Zmiany makroskopowe
- Wynik dodatni: często diagnoza wstępna jest wystarczająca
- Wynik ujemny: brak zmian w płucach
Hodowla bakteryjna
- Wynik dodatni:
- Biotyp 1: NAD zależne
- Biotyp 2: NAD niezależne
- Wynik ujemny: Ujemny lub zwierzę prawdopodobnie wcześniej leczone antybiotykami
Podatność na środki przeciwdrobnoustrojowe
- Wrażliwe: możliwy dobry wybór do leczenia, jeśli środek przeciwdrobnoustrojowy może dotrzeć do tkanki docelowej.
- Oporne: należy wybrać inny środek przeciwdrobnoustrojowy.
- MIC: MIC są wykonywane w celu zapewnienia, że wybrany środek przeciwdrobnoustrojowy osiąga odpowiednią wartość MIC w narządzie docelowym.
PCR
- Wynik dodatni:
- Patogen obecny w badanym materiale
- Pozwala stwierdzić obecność różnych genów patogenu, co może pomóc w serotypizacji
- Wynik ujemny:
- Ujemny lub minął za długi czas od początku trwania infekcji
- Zwierzę mogło otrzymywać antybiotyki
- Nie wszystkie izolaty można serotypizować (nietypowalne)
ELISA Antygen LPS-O
- Wynik dodatni: pomoc w serotypowaniu lub identyfikacji grupy serotypów
- Wynik ujemny: ujemny, zbyt późno po zakażeniu lub zwierzę mogło być wcześniej leczone antybiotykami
ELISA Antygen ApxIV
- Wynik dodatni: patogen obecny
- Wynik ujemny: ujemny, zbyt późno po zakażeniu lub zwierzę mogło być wcześniej leczone antybiotykami
Możliwe scenariusze
Tuczniki, w grupie których obserwuje się nagłe upadki lub objawy oddechowe (ostre)
- Sekcja zwłok 1-3 niedawno padłych lub poddanych eutanazji kaszlących świń. Gruntowna ocena płuc pod kątem martwiczo-krwotocznych obszarów konsolidacji, którym towarzyszy włóknikowe zapalenie opłucnej.
- Przekazać chore płuca do hodowli bakteryjnej i ogólnego badania APP PCR, a jeśli wynik będzie dodatni, do serotypowania PCR.
Dążenie do ujemnego statusu stada na obecność patogenu
- Pobierać próbki od 30 największych tuczników w gospodarstwie i badać 2-3 razy w roku przy użyciu testu ELISA ApxIV.