Dostępne testy:
Test immunofluorescencji pośredniej (IFA)
- Wykrywa obecność antygenu wirusowego
- Rodzaje próbek: tkanki (poronione lub zmumifikowane płody)
- Zalety:
- Wykrywa wirusa w poronionych lub zmumifikowanych płodach (dobry dowód na związek przyczynowy).
- Każdy dodatni wynik jest uznawany za istotny.
- Wady:
- Niektóre zmumifikowane tkanki są zbyt rozłożone, aby wykryć wirusa.
- Wymaga obecności znacznie większej ilości wirusa niż PCR.
- Często do zakażenia wirusem dochodziło kilka tygodni przed poronieniem lub porodem zmumifikowanych płodów.
Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR)
- Wykrywa obecność określonej sekwencji wirusowego kwasu nukleinowego (DNA)
- Rodzaje próbek: tkanki
- Zalety:
- Wysoka czułość.
- Umiarkowany koszt
- Możliwość łączenia próbek tkanek w celu obniżenia kosztów przy jednoczesnej minimalizacji utraty czułości (zwłaszcza w odniesieniu do znaczenia klinicznego).
- Wady:
- Wymaga próbek tkanek z poronionych lub zmumifikowanych płodów dla uzyskania najlepszych wyników.
- Niektóre zmumifikowane tkanki są zbyt rozłożone, by wykryć wirusa.
Test immunoenzymatyczny (ELISA)
- Wykrywa obecność przeciwciał
- Rodzaje próbek: surowica
- Zalety:
- Zwierzęta pozostają dodatnie przez kilka miesięcy do lat
- Możliwość badania dużej liczby zwierząt
- Zaszczepione zwierzęta wytwarzają znacznie niższe poziomy przeciwciał w porównaniu z zakażeniami terenowymi
- Potrzeba tylko 6-10 dni, aby stać się serododatnim
- Wady:
- Seroprewalencja jest wysoka, ponieważ patogen jest powszechny
- Niektóre testy ELISA mogą odróżnić szczepionkę od dzikiego typu wirusa.
- Szczepionki inaktywowane stymulują jedynie przeciwciała do białek strukturalnych (VP1/VP2)
- Różnicujące testy ELISA ukierunkowane na białka niestrukturalne (NS)
Hamowanie hemaglutynacji (HI)
- Wykrywa obecność przeciwciał
- Rodzaje próbek: surowica
- Zalety:
- Zwierzęta pozostają pozytywne przez kilka miesięcy do lat
- Wyższa czułość niż ELISA (możliwość wykrycia niższego stężenia przeciwciał)
- Zaszczepione zwierzęta wytwarzają znacznie niższe poziomy przeciwciał w porównaniu z zakażeniami terenowymi
- Poszczepienne zwykle ≤ 1:500
- Zakażenie terenowe ≥ 1:2000
- Zwierzęta wykazują wynik seropozytywny już po 6 dniach od zakażenia.
- Wady:
- Niewykonalne dla dużej liczby próbek.
- Wiarygodność w dużym stopniu zależy od umiejętności laboranta.
- Reaktywność zależy od temperatury inkubacji.
Interpretacja wyników:
IFA
- Dodatni: wirus jest obecny w płodzie
- Ujemny: ujemny lub zakażenie nastąpiło we wczesnym okresie ciąży i jest zbyt późno lub tkanka jest zbyt rozłożona, aby wykryć wirusa
PCR:
- Dodatni: wirus jest obecny w płodzie
- Ujemny: ujemny lub zakażenie nastąpiło we wczesnym okresie ciąży i jest zbyt późno lub tkanka jest zbyt rozłożona, aby wykryć wirusa
ELISA (ELISA różnicująca)
- Dodatni:
- Niskie wartości - ekspozycja na szczepionkę w przeszłości (>6 dni)
- Wysokie wartości - niedawne narażenie na wirusa typu dzikiego
- Ujemny: ujemny lub infekcja szczepem terenowym zbyt wczesna do wykrycia.
HI
- Dodatni:
- Niskie wartości - ekspozycja na szczepionkę w przeszłości (>6 dni)
- Wysokie wartości - niedawne narażenie na wirusa typu dzikiego
- Ujemny: ujemny lub infekcja szczepem terenowym zbyt wczesna do wykrycia.
Możliwe scenariusze:
Stado loch z niepłodnością i zmumifikowanymi płodami
- Zebrać 4-8 płodów (docelowo zmumifikowane płody) i połączyć próbki do badania PCR.
- Lochy / loszki, które poroniły: pobrać surowicę
- Jeśli miana HI wynoszą ≥ 1:2000 – potwierdzenie niedawnej infekcji wirusowej
- W przeciwnym razie ponów badanie za 2-4 tygodnie i porównaj miana w czasie, szukając > dwukrotnego wzrostu.
Stado loch z niepłodnością i NIE zmumifikowanymi płodami:
- Pobrać surowicę od loch roniących i normalnych loch dzisiaj i ponownie zbadać te same zwierzęta za 2-4 tygodnie.
- Jeśli miana HI wynoszą ≥ 1:2000 – potwierdzenie niedawnej infekcji wirusowej
- W przeciwnym razie porównaj miana w czasie, szukając > dwukrotnego wzrostu
- Oceń lochy roniące pod kątem rozkładu liczby przebytych porodów
- Zakażenie parwowirusem jest częstsze u zwierząt w 1. lub 2. ciąży, ponieważ u starszych zwierząt istnieje większe prawdopodobieństwo, że są już odporne.